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CFSE是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有细胞膜通透性，能够自由进入细胞；当CFSE扩散穿过细胞膜，会与细胞内源酯酶产生水解反应而被激发，发出绿色荧光，这些带荧光的CFSE会进一步与细胞骨架蛋白结合，形成稳定的胞内荧光蛋白。每当细胞进行分裂增殖，胞内荧光蛋白会被平均分配到下一代细胞中，因此细胞荧光强度会随着增殖代数增加而不断地降低，可用流式细胞仪进一步侦测分析得出细胞分裂增殖的情况。CFSE的浓度，对于终判断细胞增殖结果有直接性的影响！

衰老细胞的细胞器发生变化，如高尔基体和溶酶体数量增多、体积增大，导致细胞质内颗粒明显增多。细胞培养时可能导致衰老的原因：1.细胞密度过高或过低，细胞过密产生接触作用，导致细胞的活力减弱以及细胞增殖减慢，后出现衰老。2.长时间未更换细胞培养基.3.使用劣质细胞培养试剂，使用合适的培养基，不同的细胞对培养基的要求不同，所以筛选适合细胞培养的培养基，预防细胞衰老，维持细胞正常生长。

细胞衰老的检测：1.DNA损伤检测，在衰老细胞中会启动DNA 损伤信号p53，细胞衰老通路p53是被细胞DNA损伤而受到DNA损伤回应通路的激。2. β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal)活性染色，β-半乳糖苷酶主要位于溶酶体， 当细胞衰老发生时， 溶酶体膨胀并且增多， β-半乳糖苷酶明显积累在溶酶体中， 因此SA-β-gal染色法为检测细胞衰老普遍常见的指标。不过在一些特殊情况下，例如，饥饿引发的细胞休眠(quiescence)也会出现SA-β-gal染色呈现阳性。